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Gibco血清對胞轉染效率的影響解讀

發布時間: 2022-07-21  點擊次數: 1133次
  傳統轉染試劑有一定的細胞毒性,在轉染過程由于提高細胞的通透性因而不能在培養基中添加抗生素如陽離子脂質體。帶正電的脂質體與核酸帶負電的磷酸基團形成復合物被細胞內吞。Gibco血清中含有大量的蛋白質,在轉染過程中,帶負電的蛋白質可能干擾陽離子脂質體對核酸的吸附,影響轉染效率。另外,使用脂質體等轉染試劑時,由于含血清轉染會將血清中的蛋白帶入細胞,引發細胞毒性,導致轉染效率降低,故不能有血清轉染。這些轉染試劑要求在轉染前換無血清培養基,轉染后4-6h在更換成有血清培養基,這其實是為了減輕轉染造成的細胞毒性。
 
  可使用非脂質體的轉染試劑,比如納米材料試劑,轉染過程中就可以加血清,這樣也可以提高細胞轉染效率。
 
  不同細胞及轉染試劑要求轉染的條件是不同的。可在一次實驗前做一個預實驗,細胞是否加血清,對不同的細胞是有不同的影響的,有些細胞是可以有血清的,有些加Gibco血清就會受影響。所以,普通的轉染試劑一定要進行預實驗和條件優化。
 
  細胞毒性的大小往往意味著對細胞生理活動影響的大小。這會對相關研究數據產生嚴重的干擾,甚至影響研究的結論。因此,選擇一種高效方便的轉染試劑是細胞轉染成功的關鍵。




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